一、疫苗研发方案
（Ⅰ）小鼠细胞培养疫苗实验阶段
细胞培养疫苗有细胞培养灭活疫苗和细胞培养活疫苗两类，前者多以强毒毒株培养增殖制造，后者则用弱毒毒株增殖生产，两者的制造程序既有相同之处，又有区别。由于病毒不同与疫苗性质不同，所采用的细胞及细胞培养方法也有所不同。
（一）种毒与毒种继代
用于制苗用的种毒应经毒力、最小免疫量、安全性、无菌检定合格，通常为冻干品，由国家指定的苗毒种保藏部门检定分发。
领取的种毒应按规定在细胞继代培养适应后用作毒种，制苗用毒种应按规定控制在一定代数以内，或为湿毒毒种，或为冻干毒种。
（二）细胞制备
制造疫苗用的细胞大体为原代细胞和传代细胞两类，根据病毒种类、疫苗性质与工艺流程选择不同的细胞。 选择的依据包括：病毒的适应性高、毒价高、细胞来源方便、制备简单、生命力强。 如脊髓灰质炎活疫苗选择vero细胞；狂犬病弱毒细胞适应疫苗采取BHK21细胞增殖病毒猪瘟兔化弱毒牛睾丸细胞疫苗采用犊牛睾丸原代细胞等。 培养细胞和增殖病毒用的营养液又称培养液，通常分为细胞培养用的生长液和病毒增殖用的维持液，两者不同的之处通常只是生长液内含有5%-10%的血清；维持液血清浓度为2%-5%。 不同细胞所需的营养成分和生长条件不尽相同。 目前常用的细胞培养方法为静止培养和转瓶培养，至于微载体培养和悬浮培养在我国尚处于试验之中。
（四）接毒与收获
病毒接种培养有同步与异步之分，前者在细胞分装同时或不久接种毒种，进行培养，如猫、犬传染性肠炎疫苗(细小病毒)；后者在细胞形成单层后接种毒种，如流行性乙型脑炎细胞培养疫苗。通常在细胞形成单层后倾去培养液，按1%-2%量接种毒种，经吸附后加入维持液继续进行培养，待出现70%-85%以上细胞病变时即可收获。
病毒培养液收获时间和方法依疫苗性质而定，可将培养瓶冻融数次后收集；或加入EDTA-胰蛋白酶液消化分散收取；或在病毒增殖培养过程中可收获5-7次毒液，细胞毒液经无菌检验、毒价测定合格后供配苗用。病毒在易感动物体内可大量增殖，但在各器官组织、部位中增殖病毒的量却有很大的差异，利用病毒增殖迅速、含毒量高的组织制造的疫苗称为组织疫苗(tissue vaccine)。
动物组织疫苗包括动物组织灭活疫苗和动物组织弱毒活苗两类，前者多数由强毒株制造，如猪瘟结晶紫疫苗、狂犬病羊脑组织疫苗；后者均以弱毒株生产，如猪瘟兔化弱毒乳兔组织疫苗、牛瘟兔化弱毒组织疫苗等。
（一）动物选择
动物质量直接影响到组织疫苗的质量，特别是对疫苗的安全性和效力有着决定性的作用，动物必须符合下列标准：
(1)应该是清洁级(二级)以上的等级实验动物，即无规定的人兽共患性病原体动物；
(2)应是对所接种病毒易感性高的动物，即在品种、年龄和体重方面合乎要求的实验动物。
（二）种毒与接种
种毒既可用抗原性优良、致死力强的自然毒株脏器组织毒或强毒株增殖培养物，也可用弱毒株组织毒种。无论何种种毒都须经纯粹、抗原性和免疫原性检查合格后使用。
接种途径依病毒性质和目的而异，例如猪瘟结晶疫苗，采取猪肌肉注射血液毒种；牛瘟兔化弱毒疫苗，以兔耳静脉注射脾淋毒种；狂犬病疫苗，用兔脑毒种接种绵羊脑内途径感染。
几种动物常用的接种途径如下：
1. 脑内注射：颅前后中线5mm平行线与瞳孔横线交叉处。
2. 静脉注射：家兔由耳静脉注入；鸡自翅下肢静脉注入。
3. 肌肉注射：选择腿部、胸部、臀部等肌肉丰满处注射。
4. 皮下注射：家兔和豚鼠可选择在腹部或后腿内注射。
5. 腹腔注射：家兔与豚鼠可选腹股沟处刺入腹腔。
（三）观察与收获
动物在接种感染后应每天观察和检查规定的各项指标，指标或项目因不同病毒而异。常规观察、检查的项目如食欲、精神和活动状态、体温、粪便、尿和血液变化等。
根据观察的征象和检查的结果选出符合要求的发病动物按规定方式剖杀，采取收集含毒量高的器官组织。如猪瘟结晶紫疫苗采取发病猪的血液制备；兔出血症组织灭活疫苗采集病兔肝脏生产；狂犬病疫苗利用发病羊的羊脑组织制造。
（四）制 苗
1．组织灭活疫苗
采取收获的组织经无菌检验及毒价测定合格后，按规定比例加入平衡液和灭活剂（甲醛、酚、结晶紫等）制成匀浆，然后按不同病毒的灭活温度、时间进行灭活。如狂犬病疫苗配制按脑组织1:4加入含有甘油及1%酚蒸馏水，于360.5C灭活7天制成；猪瘟结晶紫疫苗配制，按血毒4份，结晶紫甘油溶液1份混合，于37C~38C灭活6~8天。
2. 弱毒组织疫苗
在无菌操作下剔除脏器上的脂肪与结缔组织等，称重后剪碎，加入适最保护剂制成匀浆，然后滤过扣除残渣量，再按滤液中的实际组织量计算稀释倍数，加入余量保护剂和青链霉素500~1000U(g/ml)，充分摇匀后置0~4C冷暗处处理一定时间后作无菌检验与毒价测定。合格者进行分装，冷冻真空干燥制成冻干疫苗。
（五）疫苗检定，测定有效性和安全性
二、临床前研究、临床研究
（一）临床前及临床研究
新药开发阶段如下：
临床前试验： 由制药公司进行的实验室和动物研究，以观察化合物针对目标疾病的生物活性，同时对化合物进行安全性评估。这些试验大概需要3.5 年的时间。
研发中新药申请（Investigational New Application, IND）： 在临床前试验完成后，公司要向FDA 提请一份IND，之后才能开始进行药物的人体试验。如果30 天内FDA 没有发出不予批准的申明，此IND 即为有效。提出的IND 需包括以下内容：先期的试验结果，后续研究的方式、地点以及研究对象；化合物的化学结构；在体内的作用机制；动物研究中发现的任何毒副作用以及化合物的生产工艺。另外，IND 必须得到制度审核部门（the Institutional Review Board）的审核和批准。同时，后续的临床研究需至少每年向FDA 提交一份进展报告并得到准许。
临床试验，Ⅰ期： 此阶段大概需要1 年时间，由20～80 例正常健康志愿者参加。这些试验研究了药物的安全性方面，包括安全剂量范围。此阶段的研究同时确定了药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄、以及药物的作用持续时间等项目。
临床试验，Ⅱ期： 此阶段需要约100 到300 名志愿患者参与进行一些控制研究，以评价药物的疗效。这个阶段大约需要2 年时间。
临床研究，Ⅲ期： 此阶段持续约3 年时间，通常需要诊所和医院的1000～300 名患者参与。医师通过对病患的监测以确定疗效和不良反应。
目前，河南暴雨灾后重建正紧张进行，生产生活秩序正逐步恢复。大灾之后防大疫，除了相关部门要做好传染病疫情监测、病媒生物监测以及环境等方面的安全监测外，公众也应做好生活防疫。洪涝灾害发生后，改变了蚊子、老鼠、苍蝇等病媒生物的生存环境，更利于它们传播疾病。大家应该如何做才能不让它们肆意为祸呢？上海疾控中心给出以下建议：
防蚊：防叮咬、控制孳生环境、降低成蚊密度
降雨积水增加了蚊虫孳生地，尤其是适应伊蚊的小型积水增加，雌蚊就会在积水里大量产卵，蚊虫数量会急骤上升，增加了蚊虫传播疾病的机率，可能导致乙型脑炎、登革热、疟疾等疾病的传播。
在防蚊叮咬方面，有条件的地区，临时居住处应该安装简易纱门和纱窗；尽量使用蚊帐；睡觉前点燃蚊香（有电的环境可以用电热蚊香，无电的环境只能用盘式蚊香）；或在暴露皮肤处涂抹避蚊剂防止叮咬。
同时，要控制蚊虫孳生环境。当暴雨停止，因下雨造成的各种洼地和坑、沟等要及时填平，生活区域采取翻缸倒罐清除积水；对不能清除的积水投放或喷洒灭蚊幼剂杀灭蚊幼。
为了降低成蚊密度，还应组织专业队伍，在室外环境开展超低容量或热烟雾喷洒快速灭蚊，必要时室内环境进行滞留喷洒灭蚊。
防鼠：提前规划防鼠措施，活鼠死鼠都要处理
洪涝灾害发生后，鼠类总体数量急剧减少，但在高地或高坡上，密度会增加数倍以上，而且健康、灵敏、强壮和亚成年鼠比例上升。活动区域相对缩小，造成家栖鼠和野栖鼠混居，增加了鼠体外寄生虫和鼠间病原体的交换。由于褐家鼠善游泳，水灾后它的比例会增加，褐家鼠作为流行性出血热病毒和钩端螺旋体的主要宿主，导致这两种疾病的发病可能性增加。
对此，上海疾控建议，提前规划防鼠措施。对于临时住处的防鼠，由于灾害期间人群活动范围小，生活和生产的用品少而简单，防鼠比较容易而且效果好。防鼠从灾害事件发生后临时住处或聚居地设点起开始规划，临时住处要整齐，禽畜圈养，杂物堆放离地，食品妥善保管，整理环境，铲除杂草。发现鼠洞要堵塞。
当大家返回家园后也应注意防鼠，返家时应注意检查所带的物品，避免夹带老鼠。返家时要彻底搞好室内和环境卫生，尽量用容器存放粮食。随后一周要注意检查有无新鲜的鼠粪和鼠洞，一旦发现，及时灭鼠和堵洞。
对于重建的房舍防鼠措施也是必不可少的。当修理旧房或重新建造新居时，规划防鼠设施。如门、窗与框的空隙小于0.6厘米；地面硬化；管道和电线的穿墙孔要用水泥堵塞；禽舍和畜圈远离住宅；厕所要考虑防蝇防鼠。
在防鼠方法上，上海疾控提醒，首选器械灭鼠。用鼠笼、鼠夹、粘鼠板等器械和物理的方法捕鼠。
当鼠密度极高或人群受到鼠传疾病严重威胁的时候，则在严密的组织下，在充分宣传的前提下，室内外投放溴敌隆、溴鼠灵或氟鼠灵毒饵。晚上投放，早晨收起或用物品掩盖，晚上再投放或暴露，发现毒饵消耗，加倍补充。毒饵要有警戒色，投饵点有标记。毒饵投放由专业人员或受过培训的人员实施。卫生部门要做好中毒急救的各项准备。
老鼠死后，鼠体外寄生的革螨、恙螨、跳蚤等会脱离鼠体游离于地面。发现死鼠后，应在死鼠周边喷洒杀虫剂以杀灭蚤、螨等。
防蝇：室内外注意灭蝇、控制孳生地
洪涝灾害的发生给城市垃圾的清运造成影响，堆积的未能及时清运的垃圾会成为蝇类的孳生地。局部地区停电时间过长，存放在冰箱、冰柜里的食物会腐败变质成为蝇类孳生物。另外，洪涝灾害会造成动物死亡，未及时发现并清理也会成为蝇类孳生物。
对此，上海疾控表示，室内外要注意灭蝇，室内灭蝇应结合成蚊控制，喷洒与灭蚊相同的药物。同时在多蝇场所用毒蝇绳、灭蝇毒饵杀灭苍蝇。也可挂粘蝇带或粘蝇纸粘捕成蝇。
室外灭蝇则应在临时居住处外300米之内的室外环境，设置捕蝇笼屏障带。对粪便、临时厕所、临时生活垃圾收集点等成蝇密度高的环境，每日多次实施超低容量喷雾杀灭成蝇。
同时，要控制蝇类孳生地。对人畜粪便、临时厕所、临时生活垃圾收集点、动物尸体等各类孳生物质，撒布或喷洒灭蝇幼剂控制蝇类孳生。
洪涝灾害发生 这些疾病防控很重要
洪涝灾害发生后，由于饮水饮食卫生状况恶化、环境污染、病媒生物孳生、人群接触机会增加及抵抗力下降等因素影响，容易发生各种传染病特别是肠道传染病、虫媒和自然疫源性传染病、经密切接触的传染病等的增加，中国疾控中心提醒，做好以下疾病的防控工作十分重要。
肠道传染病是病原体经口侵入肠道并引起腹泻和/或其他脏器及全身性感染的一类疾病。灾区常见肠道传染病主要有细菌性痢疾、霍乱、伤寒和副伤寒、其他如沙门菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、致病性大肠杆菌、耶尔森氏菌等细菌引起的细菌性感染性腹泻病、病毒性腹泻病（轮状病毒、杯状病毒、肠道腺病毒和星状病毒感染性腹泻），以及寄生虫腹泻病（隐孢子虫等）。其他肠道传染病还包括甲型肝炎、戊型肝炎、手足口病等。
自然疫源性疾病是指在自然条件下长期存在、在野生动物间流行，并在一定条件下会感染人类的疾病。自然疫源性疾病受自然因素的影响比较显著，由于洪灾期间自然环境的改变，包括温度、湿度、水位及媒介生物的栖息地变化影响了病原体、传染源、传播媒介和宿主的生长繁殖和生活习性；另一方面，自然灾害发生期间灾区群众居住条件恶劣、营养不良、精神心理压抑，使机体对疾病的抵抗力下降及灾区卫生防病措施被损害等均易导致自然疫源性疾病的流行和暴发。洪灾后需要重点预防的自然疫源性传染病有肾综合征出血热（流行性出血热）、钩端螺旋体病、流行性乙型脑炎、疟疾、血吸虫病、鼠疫、炭疽、布鲁氏菌病等。 （资料来源：中国疾控中心、上海疾控中心微信公众号）
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